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简介扎冲十三味丸Zhachong Shisanwei Pills,ZSP)又名嘎日迪十三味丸、十三味麝香丸、十三味大鹏金翅丸、扎冲朱素木,在蒙医临床上使用历史较长,此方由木香、诃子、甘草、麝香、肉豆蔻、制 ...
扎冲十三味丸(Zhachong Shisanwei Pills,测多测定成分ZSP)又名嘎日迪十三味丸、评法十三味麝香丸、蒙药十三味大鹏金翅丸、扎冲中种扎冲朱素木,味丸在蒙医临床上使用历史较长,测多测定成分此方由木香、评法诃子、蒙药甘草、扎冲中种麝香、味丸肉豆蔻、测多测定成分制草乌、评法石菖蒲、蒙药丁香、扎冲中种沉香、味丸珍珠(制)、磁石(煅)、禹粮土、珊瑚(制)共13味单药组成,具有除“协日乌素”、镇静安神、祛风通窍、舒筋活血功效,用于左痰右痪、手脚麻痹、腰腿不利、言语不清、口眼歪斜、神经麻痹、半身不遂、筋骨疼痛、关节疼痛、风湿。临床上用于治疗缺血性脑血管病(白脉病)、风湿性关节炎(协日乌素病)、面肌痉挛、周围性神经麻痹、坐骨神经痛、冠心病心绞痛等疾病。
蒙药是蒙古族历代蒙医经典医籍传承的宝贵财富,具有独特的功效。近几年研究蒙药复方的学者和研究人员逐渐增多,同时,为了顺应国际和国内的用药需求,对蒙药复方的质量控制也不再是单一成分的含量测定,而通过对多成分同时测定实现蒙药复方的多指标质量评价。一测多评法(quantitative analysis of multi-components by single-marker,QAMS)是一种采用1个成分来实现对多个成分同步监控的有效方法,近年来在蒙药复方制剂多指标成分定量测定中得到广泛应用。本实验采用QAMS法同时测定ZSP中主要活性成分没食子酸、鞣花酸、绿原酸、丁香酚、β-细辛醚、α-细辛脑、甘草酸铵、沉香四醇的含量,为蒙药ZSP的多指标质量控制提供实验依据和参考方法。
1 仪器与材料
1.1 仪器
Agilent 1260 Infinity II型高效液相,美国Agilent科技有限公司;Agilent Zorbax SB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);Inertsil ODS-3柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);BDS HypersilTM C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);岛津LC-20A(20A)型高效液相,日本岛津科技有限公司;QUINTIX35-1CN型十万分之一电子天平,赛多利斯科学仪器(北京)有限公司;KQ-300VDY型医用超声波清洗器,昆山市超声仪器有限公司。
1.2 材料
ZSP,9个批次,批号1908003、1908005、1908008、1909010、1909011、1909016、1911004、1911005、1911006,内蒙古奥特奇蒙药股份有限公司。对照品没食子酸(批号110831-201605,质量分数90.8%)、绿原酸(批号110753-200413,质量分数99.3%)、鞣花酸(批号111959-201903,质量分数88.8%)、沉香四醇(批号111980-201904,质量分数98.6%)、丁香酚(批号110725-201917,质量分数99.1%)、甘草酸铵(批号110731-201619,质量分数93.0%)、α-细辛脑(批号100298-201203,质量分数100.0%)、β-细辛醚(批号112018-201802,质量分数99.3%)均购于中国食品药品检定研究院。甲醇为色谱纯;水为超纯水;其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 HPLC定量方法
2.1.1 色谱条件
Inertsil ODS-3柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱:0~7 min,30%甲醇;7~20 min,30%~51%甲醇;20~28 min,51%~59%甲醇;28~55 min,59%~75%甲醇;检测波长为0~7 min,271 nm(没食子酸);7~20 min,252 nm(绿原酸、沉香四醇);20~28 min,254 nm(鞣花酸);28~33 min,281 nm(丁香酚);33~45 min,257 nm(β-细辛醚、α-细辛脑);45~55 min,237 nm(甘草酸铵);体积流量1.0 mL/min;柱温30 ℃;进样量7 μL。该色谱条件下对照品及样品色谱图见图1。
2.1.2 混合对照品溶液制备
分别精密量取没食子酸、绿原酸、沉香四醇、鞣花酸、丁香酚、β-细辛醚、α-细辛脑、甘草酸铵对照品储备液适量,混合均匀,加甲醇进行稀释,制成含没食子酸0.184 mg/mL、绿原酸0.116 mg/mL、沉香四醇0.167 mg/mL、鞣花酸0.063 mg/mL、丁香酚0.207 mg/mL、β-细辛醚0.042 mg/mL、α-细辛脑0.025 mg/mL、甘草酸铵0.094 mg/mL的混合对照品溶液。
2.1.3 供试品溶液制备
精密称取样品2.0 g,置于具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25 mL,密塞,称定质量,超声35 min,放冷至室温,甲醇补足减失的质量,摇匀,滤过,取续滤液经0.45 µm微孔滤膜滤过,即得供试品溶液。
2.1.4 线性关系考察
将“2.1.2”项下混合对照品
溶液按照“2.1.1”项下色谱条件分别进样0.5、2.0、3.5、5.0、6.5、8.0 μL,记录色谱峰面积。以峰面积为纵坐标(Y),对照品质量为横坐标(X)进行线性回归,各组分的回归方程及相关系数见表1。可见该方法在试验范围内线性关系良好。
2.1.5 精密度试验
精密吸取“2.1.2”项下混合对照品溶液,以“2.1.1”项下色谱条件重复进样6次,记录峰面积,没食子酸、绿原酸、沉香四醇、鞣花酸、丁香酚、β-细辛醚、α-细辛脑、甘草酸铵峰面积的RSD值分别为0.40%、0.73%、0.35%、0.51%、0.93%、0.79%、1.81%、1.69%,表明在该条件下仪器精密度良好。
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相关链接:甲醇,草酸铵,丁香酚
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